REAGEN-™ Streptomycin ELISA Test Kit ist ein wettbewerbsfähiger Enzym Immunoassay für die quantitative Analyse des Streptomycins und des Dihydrostreptomycins in der Zufuhr, im Honig, in der Niere, in der Leber, im Fleisch (Rindfleisch, Huhn und Schweinefleisch), in der Milch, im Serum und im Urin.
Beispielart |
Nachweisgrenze (ng/g oder ppb) |
Zufuhr |
5 |
Honig |
2 |
Fleisch/Leber/Niere |
5 |
Milch |
1 |
Milchpulver |
1 |
Serum/Urin |
0,5 |
Analyten |
Kreuzreaktivität (%) |
Streptomycin |
100 |
Schnelle (10 - 30 Minuten) und organische Reagens-freie Extraktionsmethoden für verschiedene Proben mit Hochwiederaufnahme (75 - 115%).
Hohe Empfindlichkeit (0,05 ng/g oder ppb) und niedrige Nachweisgrenze (1 ng/g oder ppb für Fleisch und Milch).
Hohe Reproduzierbarkeit.
Eine schnelle ELISA-Probe (weniger als 2 Stunden unabhängig davon Zahl von Proben).
Die Methode basiert auf einer wettbewerbsfähigen kolorimetrischen ELISA-Probe. Der Streptomycinantikörper ist in den Plattenbrunnen beschichtet worden. Während der Analyse wird Probe zusammen mit dem Streptomycinmeerrettichperoxidase-konjugat hinzugefügt. Wenn der Streptomycinrückstand in der Probe anwesend ist, er für den Streptomycinantikörper konkurriert, dadurch es verhindert es, dass das Streptomycin-HRP zum Antikörper bindet, der zum Brunnen befestigt wird. Die resultierende Farbintensität, nach Zusatz des HRP-Substrates (TMB), hat ein umgekehrtes Verhältnis zur Streptomycinrückstandkonzentration in der Probe.
Beschriften Sie die einzelnen Streifen, die und Aliquotereagenzien als das folgende Beispiel benutzt werden:
Komponente |
Volumen pro Reaktion |
24 Reaktionen |
Streptomycin-Antikörper #1 |
50 ml |
1,2 ml |
HRP-konjugierter Antikörper #2 |
50 ml |
1,2 ml |
Lösung der Wäsche-1X |
2,0 ml |
48 ml |
Endpuffer |
100 ml |
2,4 ml |
TMB-Substrat |
100 ml |
2,4 ml |
Fügen Sie 50uL von jedes Streptomycin-Standards in doppelter Ausführung in verschiedene Brunnen hinzu (F addieren Standards, um nur im Auftrag von der niedrigen Konzentration zur hohen Konzentration zu überziehen).
Fügen Sie UL 50 jeder Probe in doppelter Ausführung in verschiedene Beispielbrunnen hinzu.
Fügen Sie UL 50 von HRP-Konjugieren Antikörper #2 hinzu und 50mL Antikörper #1 zu jedem Brunnen, mischen gut, indem er leicht manuell die Platte für 1 Minute schaukelt.
Brüten Sie die Platte für 30 Minuten bei Zimmertemperatur aus (20 – 25°C/68 – 77°F) ( F vermeiden direktes Sonnenlicht und kalte Bankspitzen während der Ausbrütung. Abdeckung der Mikrotiterplatte, während das Ausbrüten empfohlen wird).
Waschen Sie die Platte 5mal mit UL 250 der Lösung der Wäsche-1X. Nach der letzten Wäsche wandeln Sie die Platte um und klopfen Sie leicht das Plattentrockene auf Papierhandtüchern (F führen den nächsten Schritt sofort nach Plattenreinigungen durch. Lassen Sie die Platte nicht zwischen Arbeitsgängen lufttrocknen).
Fügen Sie UL 100 von TMB-Substrat hinzu. Setzen Sie Zeit Reaktion sofort nach dem Addieren des Substrates fest. Mischen Sie die Lösung, indem Sie leicht manuell schaukeln die Platte für 1 Minute beim Ausbrüten ( F setzen kein Substrat zurück zu dem ursprünglichen Behälter, um jede mögliche Verschmutzung zu vermeiden. Jede mögliche Substratlösung, die Färbung aufweist, ist von der Verschlechterung hinweisend und sollte weggeworfen werden. Abdeckung der Mikrotiterplatte, während das Ausbrüten empfohlen wird).
Nachdem Sie bei Zimmertemperatur für 15 Minuten ausgebrütet haben (20 – 25°C/68 – 77°F), fügen Sie UL 100 des Endpuffers hinzu, um die Enzymreaktion zu stoppen.
Lesen Sie die Platte, die so bald wie möglich der Einführung des Endpuffers auf einem Plattenleser mit 450 Nanometer der Wellenlänge folgt (F vor Lesung, benutzen ein fusselfreies Abwischen auf der Unterseite der Platte, um sicherzustellen, dass keine Feuchtigkeit oder Fingerabdrücke die Lesungen behindern).
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