Furaltadon (AMOZ) ELISA-Test-Kit zur Erkennung von Honig Garnelen / Fleisch / Hepar

Furaltadon (AMOZ) ELISA-Test-Kit

Beschreibung des Produkts

REAGEN^TMFuraltadon ((AMOZ) ELISA Test Kit bietet eine wettbewerbsfähige Enzymimmunanalyse für die quantitative Analyse von Furaltadon in Fisch, Garnelen, Fleisch (Hühnerfleisch, Rindfleisch, Schweinefleisch und Hepar), Eiern und Honig.

• Schnelle (4 Stunden), hohe Rückgewinnung (80-105%) und kostengünstige Extraktionsmethoden für verschiedene Proben.

• Hohe Empfindlichkeit (0,05 ng/g oder ppb) und niedrige Detektionsgrenze (0,1 ng/g oder ppb) für verschiedene Proben.

• Hohe Reproduzierbarkeit.

• Eine schnelle ELISA-Analyse (weniger als 1 Stunde, unabhängig von der Anzahl der Proben).

Übersicht über das Verfahren

Die Methode basiert auf einem kompetitiven kolorimetrischen ELISA-Assay.Die Probe und der AMOZ-Antikörper werden zusammen mit dem sekundären Antikörper hinzugefügt.Wenn der AMOZ-Rückstand in der Probe vorhanden ist, wird er um den AMOZ-Antikörper konkurrieren.Damit wird verhindert, dass sich der Antikörper an den am Brunnen befestigten AMOZ-BSA bindet.Die daraus resultierende Farbintensität hat nach Zugabe des HRP-Substrats (TMB) eine umgekehrte Beziehung zur Konzentration des AMOZ-Rückstands in der Probe.

Inhalt, Aufbewahrung und Haltbarkeit

REAGEN^TMDas Furaltadon (AMOZ) ELISA-Test-Kit ist für 96 Bestimmungen oder die Prüfung von 42 Proben in doppelter Form (unter Annahme von 12 Bohrlöchern für Normen) geeignet.Alle nicht verwendeten Mikrowellen in den Folienbeutel zurückführen und mit dem in der Originalverpackung enthaltenen Trocknungsmittel wieder versiegelnDie Haltbarkeit beträgt 12 Monate, wenn das Kit ordnungsgemäß gelagert wird.

* Wenn Sie das Kit nicht länger als einen Monat verwenden möchten, lagern Sie Antibody#1 und HRP-konjugierte Antibody #2 bei -20°C oder im Gefrierschrank.

Empfindlichkeit (Erkennungsgrenze)

Spezifität (Kreuzreaktivität)

Notwendige Materialien, die nicht im Kit enthalten sind

1.Mikrotiter-Schildleser (450 nm)

2.Inkubator

3.Tissue Mixer (z. B. Omni TissueMaster Homogenizer)

4.Rotationsverdampfer oder Stickstoffgas

5.Vortexmischer (z. B. Gneie Vortexmischer von VWR)

6.10, 20, 100 und 1000 ml Pipetten

7.Mehrkanalpipette: 50 bis 300 ml (optional)

8.Ethylacetat

9.0.1 M K2HPO4

10.n-Hexan (oder n-Heptan)

11.1M NaOH

12.1M HCL

Warnungen und Vorsichtsmaßnahmen

• Die Standards enthalten Furaltadon.

• Verwenden Sie das Kit nicht nach Ablauf des Verfallsdatums.

• Reagenzien aus verschiedenen Kits oder Partien dürfen nicht miteinander vermischt werden, außer bei Komponenten mit derselben Teilnummer innerhalb ihres Verfallsdatums.

• Versuchen Sie, eine Labortemperatur von 20° ≈ 25° C (68° ≈ 77° F) aufrechtzuerhalten. Vermeiden Sie die Durchführung von Prüfungen unter oder in der Nähe von Lüftungsöffnungen, da dies zu übermäßiger Abkühlung, Erwärmung und/oder Verdunstung führen kann.Nicht in direkter Sonneneinstrahlung durchführen, da dies zu übermäßiger Hitze und Verdunstung führen kann.Während der Inkubation sollten kalte Bänkplatten vermieden werden, indem mehrere Schichten aus Papiertüchern oder einem anderen Isoliermaterial unter die Probenplatten gelegt werden..

• Stellen Sie sicher, dass Sie nur destilliertes oder deionisiertes Wasser verwenden, da die Wasserqualität sehr wichtig ist.

• Bei Pipettierung von Proben oder Reagenzien in eine leere Mikrotiterplatte legen Sie die Pipettenspitzen in die untere Ecke des Brunnens und setzen sie in Kontakt mit dem Kunststoff.

• Die Inkubation der Probenplatten sollte so genau wie möglich geplant werden.

• Es werden nur in der Reihenfolge von niedriger Konzentration bis zu hoher Konzentration Standards auf die Platte hinzugefügt, da dadurch das Risiko einer Beeinträchtigung der Standardkurve minimiert wird.

• Platten in versiegelten Beuteln mit einem Trocknungsmittel immer kühlen, um ihre Stabilität zu gewährleisten.Verhindern Sie die Bildung von Kondens auf den Platten, indem Sie sie während der Verpackung auf Raumtemperatur (20 25 °C / 68 77 °F) ausbalancieren lassen..

Vorbereitung der Probe

Stellen Sie sicher, dass die Proben ordnungsgemäß gelagert sind. Im Allgemeinen sollten die Proben bei 2-4°C für nicht mehr als 1-2 Tage gekühlt werden. Wenn sie länger gelagert werden müssen, müssen die Proben auf mindestens -20°C eingefroren werden.Gefrorene Proben können vor der Verwendung bei Raumtemperaturen (20°C / 68°F) oder im Kühlschrank aufgetaut werden..

Fische

• 1 g homogenisierter Probe mit 0,5 ml 1X Probenextraktionspuffer, 3,5 ml destilliertem Wasser, 0,5 ml 1 M HCl und 20 ml 50 mM 2-Nitrobenzaldehyd mischen, indem sie 30 Sekunden lang wirbeln.

• Bei 50°C bis 55°C 3 Stunden lang inkubieren, während der Inkubation die Probe 5 Sekunden lang drehen.

• 5 ml 0,1 M K2HPO4, 0,4 mL 1 M NaOH und 6 mL Ethylacetat hinzufügen, 2 Minuten im Wirbel.

• Zentrifugieren bei 4.000 x g für 5 Minuten bei Raumtemperatur (20 25 °C).

• Übertragen Sie 3 ml des Ethylacetat-Supernatants (entsprechend 0,5 g der ursprünglichen Probe) in eine neue Durchstechflasche (F Vermeiden Sie die untere wässrige Schicht!das extrahierte Ethylacetat 5 Minuten lang bei 4,000 x g wiederholt und die obere organische Schicht entnommen). Falls eine Emulsion stattgefunden hat und die obere Ethylacetat-Schicht weniger als 3 ml beträgt, wird die Probe 3 Minuten lang bei 85°C im Wasserbad inkubiert.Verwenden Sie einen Rotationsverdampfer, um die Probe in einem Wasserbad bei 60-70 °C unter reduziertem Druck zu trocknen.Alternativ kann die Probe getrocknet werden, indem Stickstoffgas in einem 60-70°C Wasserbad geblasen wird.

• Der getrocknete Rückstand wird in 1 ml n-Hexan (oder n-Heptan) gelöst.

• 1 ml von1XProbeentnahme-Puffer, wirbel die Probe für 2 Minuten.

• Die Probe wird 10 Minuten lang bei 4000 x g bei Raumtemperatur (20 ¢ 25°C / 68 ¢ 77°F) zentrifugiert.

• Für den Test werden 50 ml der unteren wässrigen Schicht pro Brunnen verwendet.

Anmerkung:Verdünnungsfaktor: 2. Um einen hohen Hintergrund zu vermeiden, wird empfohlen, parallel eine Lösungsmittel-Blankprobe vorzubereiten.mit der Reduktion von 3 ml Ethylacetat bis zur Trockenheit beginnen und mit dem Rest-Extraktionsverfahren fortfahrenDas Ergebnis der Lösungsmittelkontrolle wird von den Probenergebnissen abgezogen.

Garnelen/Fleisch/Hepar

• 1 g homogenisierte Probe mit 0,5 ml 1X-Probenextraktionspuffer, 3,5 ml destilliertes Wasser, 0,5 ml 1 M HCl und 20 ml 50 mM 2-Nitrobenzaldehyd mischen, indem sie 30 Sekunden lang wirbeln.

• Inkubation bei 50°C bis 55°C für 3 Stunden.

• 5 ml 0,1 M K2HPO4, 0,4 mL 1 M NaOH und 6 mL Ethylacetat hinzufügen, 5 Minuten im Wirbel.

• Zentrifugieren Sie bei 4.000 x g für 5 Minuten bei Raumtemperatur (20 25 °C / 68 77 °F).

• 3,0 ml des Ethylacetat-Supernatants (entsprechend 0,5 g der ursprünglichen Eiprobe) in eine neue Durchstechflasche übertragen (F Vermeiden Sie die untere wässrige Schicht!das extrahierte Ethylacetat 5 Minuten lang bei 4Die Probe wird in einem 60-70°C-Wasserbad unter reduziertem Druck mit einem Rotationsverdampfer getrocknet.Die Probe kann durch Blasen von Stickstoffgas in einem 60-70°C-Wasserbad getrocknet werden..

• Der getrocknete Rückstand wird in 1 ml n-Hexan (oder n-Heptan) gelöst.

• 1 ml von1XProbenextraktionspuffer und Wirbel der Probe für 2 Minuten.

• Die Probe wird 10 Minuten lang bei 4000 x g bei Raumtemperatur (20 ¢ 25°C / 68 ¢ 77°F) zentrifugiert.

• Für den Test werden 50 ml der unteren wässrigen Schicht pro Brunnen verwendet.

Anmerkung: Verdünnungsfaktor: 2. Um einen hohen Hintergrund zu vermeiden, wird empfohlen, parallel eine Lösungsmittel-Blankprobe vorzubereiten.mit der Reduktion von 3 ml Ethylacetat bis zur Trockenheit beginnen und mit dem Restverfahren fortfahrenDas Ergebnis der Lösungsmittelkontrolle wird von den Probenergebnissen abgezogen.

Ei

• 1 g der Eierprobe mit 0,5 ml 1X Probenextraktionspuffer, 3,5 ml destilliertem Wasser, 0,5 ml 1 M HCl und 20 ml 50 mM 2-Nitrobenzaldehyd mischen, indem sie 2 Minuten lang in einem Wirbel gedreht werden.

• Bei 50°C bis 55°C 3 Stunden lang inkubieren, während der Inkubation die Probe 5 Sekunden lang drehen.

• 5 ml 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml 1 M NaOH und 6 ml Ethylacetat hinzufügen, 5 Minuten mit maximaler Geschwindigkeit wirbeln.

• Zentrifugieren Sie bei 4.000 x g für 10 Minuten bei Raumtemperatur (20 25 °C / 68 77 °F).

• 3,0 ml des Ethylacetat-Supernatants (entsprechend 0,5 g der ursprünglichen Honigprobe) in eine neue Durchstechflasche übertragen (F Vermeide die untere wässrige Schicht!das extrahierte Ethylacetat 5 Minuten lang bei 4Die Probe wird in einem 60-70°C-Wasserbad unter reduziertem Druck mit einem Rotationsverdampfer getrocknet.Die Probe kann durch Blasen von Stickstoffgas in einem 60-70°C-Wasserbad getrocknet werden..

• Der getrocknete Rückstand wird in 1 ml n-Hexan (oder n-Heptan) gelöst.

• 1 ml von1XProbeentnahme Puffer und Wirbel für 2 Minuten.

• Die Probe wird 10 Minuten lang bei 4000 x g bei Raumtemperatur (20 ¢ 25°C / 68 ¢ 77°F) zentrifugiert.

• Verwenden Sie 50 ml der unteren wässrigen Schicht für den Test.

Anmerkung: Verdünnungsfaktor: 2. (1) Nach Verdunstung des Ethylacetat-Extraktes ist der resultierende Rückstand nicht vollständig gelöst.(2) Für diese Zubereitung, empfehlen wir, für positive Proben den Standardwert von 0,5 ng/g oder ppb zu verwenden, da bei negativen Proben erhebliche Hintergrundwirkungen auftreten können (in einigen Fällen zwischen den Normen 0.05 ng/g und0,15 ng/g).